Un des chefs-d'œuvre les plus impressionnants de toute l'histoire de la peinture. Il fut exécuté à partir de 1512 pour le couvent des Antonites d'Issenheim, près de Guebwiller, chargé de soigner les troubles nerveux ("danse de Saint Guy", "mal des ardents") et les ulcérations consécutives à des intoxications alimentaires (ergot de seigle).
Un retable existait déjà dans ce couvent ; Schongauer en avait réalisé des panneaux. On ne sait ni pourquoi ni quand une restauration fut décidée, ni pourquoi elle fut confiée à Grunewald. Le nouveau retable est constitué d'un ensemble de plusieurs panneaux peints qui s’articulent autour d’une caisse centrale composée de sculptures dues à Nicolas de Haguenau.
L'auteur, très mal connu, s'appelait probablement Mathis-Gotthard Neithard et il serait né en Bavière vers 1465 ; il est passé à la postérité sous le nom de Mathias Grünewald. Le retable comprend plusieurs scènes de la vie du Christ (Annonciation, Nativité, Concert des anges), mais surtout une Crucifixion d'un réalisme et d'un dépouillement hallucinants, où le corps torturé du Christ, couvert de blessures, verdâtre porte à son paroxysme les visions douloureuses de la passion communes au moyen-âge, et une Résurrection, d'un dynamisme tourbillonnant, où le corps glorieux du ressuscité, dans des couleurs lumineuses et chaudes entraîne le drapé du linceul dans des couleurs de plus en plus sombres et ternes à mesure qu'on s'en éloigne et contraste vigoureusement avec celui du crucifié. Il comprend aussi deux panneaux sur le saint patron du couvent, l'ermite Saint Antoine, dont l'hallucinante tentation de Saint Antoine, où les malades soignés au couvent ont pu inspirer certains personnages démoniaques. Le retable d'Issenheim est maintenant la pièce maîtresse du musée Unterlinden de Colmar, le musée le plus visité de province en France.